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小鼠ELISA試劑盒的操作步驟是怎樣的？
更新時間：2024-01-21 點擊量：2141
小鼠ELISA試劑盒是一種用于檢測小鼠樣本中特定抗原或抗體的試劑盒。這些試劑盒通常采用酶聯免疫吸附法(ELISA)技術，通過對小鼠樣本進行處理和孵育，與特異性抗體結合，再通過洗滌和顯色等步驟，最終通過檢測儀器進行信號的定量或定性分析。
小鼠ELISA試劑盒的操作步驟如下：
1、準備樣品：根據實驗需要，采集小鼠血清或組織樣本。如果使用血清樣本，需將血液收集到適當的抗凝管中，并在室溫下靜置一段時間，使血液凝固后離心獲取血清。如果使用組織樣本，需將組織進行研磨或勻漿處理，以釋放細胞內的蛋白質。
2、標準品制備：根據試劑盒說明書中提供的濃度范圍，制備一系列不同濃度的標準品溶液。通常，標準品的濃度范圍應涵蓋待測樣品中可能的白介素水平。
3、加樣：將標準品和待測樣品分別加入到相應的微孔板中。每個標準品和待測樣品都應在微孔板的多個孔中重復。確保每個孔中的體積一致，以避免誤差。
4、孵育：將微孔板密封，并放入孵育器中，在特定的溫度和時間條件下孵育。孵育的目的是讓標準品和待測樣品與試劑盒中的抗體發生特異性結合。
5、洗滌：孵育結束后，將微孔板取出，并用洗滌液洗滌幾次，以去除未結合的物質。洗滌液應充分沖洗每個孔，以確保沒有殘留物。
6、酶標記抗體添加：將酶標記抗體添加到微孔板中，并與標準品和待測樣品中的抗原結合。酶標記抗體是一種能夠與特定抗原結合的抗體，其上連接有酶標記物。
7、再次孵育：將微孔板再次密封，并放入孵育器中，在特定的溫度和時間條件下孵育。孵育的目的是讓酶標記抗體與抗原發生特異性結合。
8、底物反應：孵育結束后，將底物溶液添加到微孔板中，并與酶標記抗體上的酶標記物發生反應。底物溶液通常是一種特殊的化合物，當酶標記物與其結合時會發生顏色變化。
9、終止反應：在一定的時間后，添加終止液到微孔板中，以終止底物反應。終止液可以阻止進一步的顏色變化。
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